豬偽狂犬病(Pseudorabies)是由偽狂犬病毒引起的多種家畜和野生動物的一種急性傳染病。
除豬以外的其他動物發病后通常具有發熱、奇癢及腦脊髓炎等典型癥狀,均為致死性感染,但呈散發形式。
豬是偽狂犬病毒的自然宿主和貯存者,仔豬和其他易感動物一旦感染該病,死亡率高達100%,成年母豬和公豬多表現為繁殖障礙以及呼吸道癥狀。
豬偽狂犬病廣泛分布于世界各地。并且近年來國外報道,豬、牛及綿羊發生本病逐年增加。在我國該病也廣泛存在,并嚴重發病,尤其是豬的偽狂犬病,給我國養豬業造成了巨大的經濟損失。
偽狂犬病毒在全世界廣泛分布。偽狂犬病自然發生于豬、牛、綿羊、犬和貓,另外,多種野生動物、肉食動物也易感。水貂、雪貂因飼喂含偽狂犬病毒的豬下腳料也可引起偽狂犬病的暴發。實驗動物中家兔最為敏感,小鼠、大鼠、豚鼠等也能感染。
關于人感染偽狂犬病毒的報道很少,并且都不是以病毒分離為報道依據。如土耳其及我國臺灣曾報道有血清學反應陽性者。歐洲也曾報告數例因皮膚傷口接觸病料組織而感染,主要表現為局部有發癢,未曾報告有死亡。最新的報道見于1992年,在波蘭因直接接觸偽狂犬病毒而感染的工人,首先是手部先出現短暫的搔癢,后擴展至背部和肩部。
豬是偽狂犬病毒的貯存宿主,病豬、帶毒豬以及帶毒鼠類為本病重要傳染源。不少學者認為,其他動物感染本病與接觸豬、鼠有關。
在豬場,偽狂犬病毒主要通過已感染豬排毒而傳給健康豬,另外,被偽狂犬病毒污染的工作人員和器具在傳播中起著重要的作用。而空氣傳播則是偽狂犬病毒擴散的最主要途徑,但到底能傳播多遠還不清楚。人們還發現在鄰近有偽狂犬病發生的豬場周圍放牧的牛群也能發病,在這種情況下,空氣傳播是惟一可能的途徑。在豬群中,病毒主要通過鼻分泌物傳播,另外,乳汁和精液也是可能的傳播方式。
除豬以外的其他動物感染偽狂犬病毒后,其結果都是死亡。豬發生偽狂犬病后,其臨診癥狀因日齡而異,成年豬一般呈隱性感染,懷孕母豬可導致流產、死胎、木乃伊胎和種豬不育等綜合癥候群。15日齡以內的仔豬發病死亡率可達100%,斷奶仔豬發病率可達40%,死亡率20%左右;對成年肥豬可引起生長停滯、增重緩慢等。
偽狂犬病的發生具有一定的季節性,多發生在寒冷的季節,但其他季節也有發生。
偽狂犬病毒的臨診表現主要取決于感染病毒的毒力和感染量,以及感染豬的年齡。其中,感染豬的年齡是最主要的。與其他動物的皰疹病毒一樣,幼齡豬感染偽狂犬病毒后病情最重。
新生仔豬感染偽狂犬病毒會引起大量死亡,臨診上新生仔豬第1天表現正常,從第2天開始發病,3~5天內是死亡高峰期,有的整窩整窩死光。
同時,發病仔豬表現出明顯的神經癥狀、昏睡、嗚叫、嘔吐、拉稀,一旦發病,1~2日內死亡。剖檢主要是腎臟布滿針尖樣出血點,有時見到肺水腫、腦膜表面充血、出血。
15日齡以內的仔豬感染本病者,病情極嚴重,發病死亡率可達100%。仔豬突然發病,體溫上升達41℃以上,精神極度委頓,發抖,運動不協調,痙攣,嘔吐,腹瀉,極少康復。斷奶仔豬感染偽狂犬病毒,發病率在20%~40%左右,死亡率在10%~20%左右,主要表現為神經癥狀、拉稀、嘔吐等。
成年豬一般為隱性感染,若有癥狀也很輕微,易于恢復。主要表現為發熱、精神沉郁,有些病豬嘔吐、咳嗽,一般于4~8天內完全恢復。
懷孕母豬可發生流產、產木乃伊胎或死胎,其中以死胎為主無論是頭胎母豬還是經產母豬都發病,而且沒有嚴格的季節性,但以寒冷季節即冬末春初多發。據近年來的報道,奇癢癥狀以往在豬罕見,但目前則??梢姷?。
偽狂犬病的另一發病特點是表現為種豬不育癥。近幾年發現有的豬場春季暴發偽狂犬病,出現死胎或斷奶仔豬患偽狂犬病后,緊接著下半年母豬配不上種,返情率高達90%,有反復配種數次都屢配不上的。
此外,公豬感染偽狂犬病毒后,表現出睪丸腫脹、萎縮,喪失種用能力。
偽狂犬病毒感染一般無特征性病變。眼觀主要見腎臟有針尖狀出血點,其他肉眼病變不明顯??梢姴煌潭鹊目ㄋ晕秆缀湍c炎,中樞神經系統癥狀明顯時,腦膜明顯充血,腦脊髓液量過多,肝、脾等實質臟器??梢娀野咨珘乃啦≡?,肺充血、水腫和壞死點。子宮內感染后可發展為溶解壞死性胎盤炎。
組織學病變主要是中樞神經系統的彌散性非化膿性腦膜腦炎及神經節炎,有明顯的血管套及彌散性局部膠質細胞壞死。
在腦神經細胞內、鼻咽黏膜、脾及淋巴結的淋巴細胞內可見核內嗜酸性包涵體和出血性炎癥。有時可見肝臟小葉周邊出現凝固性壞死。肺泡隔核小葉質增寬,淋巴細胞、單核細胞浸潤。
根據疾病的臨診癥狀,結合流行病學,可做出初步診斷,確診必須進行實驗室檢查。同時要注意與豬細小病毒、流行性乙型腦炎病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬瘟病毒、弓形蟲及布魯氏菌等引起的母豬繁殖障礙相區別。
1、病毒分離鑒定
病毒的分離是診斷偽狂犬病的可靠方法?;疾游锏亩喾N病料組織如腦、心、肝、脾、肺、腎、扁桃體等均可用于病毒的分離,但以腦組織和扁桃體最為理想,另外,鼻咽分泌物也可用于病毒的分離。
病料處理后可直接接種敏感細胞,如豬腎傳代細胞(PK-15和IBRS-2)、倉鼠腎傳代細胞(BHK-21)或雞胚成纖維細胞(CEF),在接種后24~72h內可出現典型的細胞病變。若初次接種無細胞病變,可盲傳3代。
不具備細胞培養條件時,可將處理的病料接種家兔或小鼠,根據家兔或小鼠的臨診表現做出判定,但小鼠不如家兔敏感。分離到病毒后再用標準陽性血清做中和試驗以確診本病。
2、組織切片熒光抗體檢測
取患病動物的病料如腦或扁桃體的壓片或冰凍切片,用直接免疫熒光檢查。其優點是快速,在幾小時內即可獲得可靠結果,對于新生仔豬,其敏感性與病毒分離相當,但對于育肥豬與成年豬,該法則不如病毒分離敏感。
3、PCR檢測豬偽狂犬病病毒
利用PCR可從患病動物的分泌物如鼻咽拭子或組織病料中擴增豬偽狂犬病病毒的基因,從而對患病動物進行確診。PCR與病毒分離鑒定相比,具有快速、敏感、特異性強等優點,能同時檢測大批量的樣品,并且能進行活體檢測,適合于臨診診斷。
4、血清學診斷
多種血清學方法可用于偽狂犬病的診斷,應用最廣泛的有中和試驗、酶聯免疫吸附試驗、乳膠凝集試驗、補體結合試驗及間接免疫熒光等。
其中血清中和試驗的特異性、敏感性都是最好的,并且被世界動物衛生組織(OIE)列為法定的診斷方法。但由于中和試驗的技術條件要求高、時間長,所以主要是用于實驗室研究。
酶聯免疫吸附試驗同樣具有特異性強、敏感性高的特點,3~4h內可得出試驗結果,并可同時檢測大批量樣品,廣泛用于偽狂犬病的臨診診斷。
另外,近幾年來,乳膠凝集試驗以其獨特的優點也在臨診上廣泛應用,操作極其簡便,幾分鐘之內便可得出試驗結果。
5、鑒別診斷
豬偽狂犬病病毒鑒別診斷方法是在使用基因標志疫苗的基礎上應用的一類診斷方法。由于PRV中存在多個非心需糖蛋白基因,缺失這些基因的病毒突變株不能產生被缺失基因所編碼的糖蛋白,但又不影響病毒在細胞上的增殖與免疫原性。將這種基因缺失標志疫苗注射動物后,動物不能產生針對缺失蛋白的抗體。因此,可通過血清學方法將自然感染野毒的血清學陽性豬與注苗豬區分開來。
目前,缺失疫苗缺失的糖蛋白基因主要為gE和gG基因,也有缺失gC、gB基因的。針對缺失的糖蛋白已利用大腸桿菌或酵母等表達系統的表達產物建立了相應的鑒別診斷方法:gE-ELISA(酶聯免疫吸附試驗)、gG-ELISA、gC-ELISA、gB-ELISA以及gE-LAT(乳膠凝集試驗)、gG、LAT等,實驗證實這些方法的特異性強、敏感性高,可用于臨診檢測,同時乳膠凝集還具有簡單、快速的特點。
目前,在我國已有gE-ELISA、gG-ELISA和gE-LAT、 gG-LAT問世。
豬偽狂犬病尚無特效治療藥物。疫苗免疫接種是預防和控制偽狂犬病的根本措施
目前國內外已研制成功偽狂犬的常規弱毒疫苗、滅活疫苗以及基因缺失疫苗(包括基因缺失弱毒苗和滅活苗),這些疫苗都能有效地減輕或防止偽狂犬病的臨診癥狀,從而減少該病造成的經濟損失。
具體免疫程序,參考廠家推薦免疫程序。
消滅牧場中的鼠類,對預防本病有重要意義。同時,還要嚴格控制犬、貓、鳥類和其他禽類進入豬場,嚴格控制人員來往,并做好消毒工作及血清學監測等,這樣對本病的防制也可起到積極的推動作用。
此外,對豬群采血做血清中和試驗,陽性者隔離,以后淘汰。以3~4周為間隔反復進行,一直到兩次試驗全部陰性為止。
另外一種方式是培育健康豬,母豬產仔斷乳后,盡快分開,隔離飼養,每窩小豬均須與其他窩小豬隔離飼養。到16周齡時,做血清學檢查(此時母源抗體轉為陰性),所有陽性豬淘汰,30日后再做血清學檢查,把陰性豬合成較大群,最終建立新的無病豬群。
偽狂犬病毒屬于皰疹病毒科(Herpesviridae)、豬皰疹病毒屬,病毒粒子為圓形,直徑150~180nm,核衣殼直徑為105~110nm。病毒粒子的最外層是病毒囊膜,它是由宿主細胞衍生而來的脂質雙層結構。囊膜表面有長約8~10nm呈放射狀排列的纖突。
偽狂犬病毒是皰疹病毒科中抵抗力較強的一種。在37℃下的半衰期為7h,8℃可存活46天,而在25℃干草、樹枝、食物上可存活10~30天,但短期保存病毒時,4℃較-15℃和-20℃凍結保存更好。病毒在pH4~9之間保持穩定。5%石炭酸經2min滅活,但0.5%石炭酸處理32天后仍具有感染性。0.5%~1%氫氧化鈉迅速使其滅活。對乙醚、氯仿等脂溶劑以及福爾馬林和紫外線照射敏感。
偽狂犬病毒V只有一個血清型,但不同毒株在毒力和生物學特征等方面存在差異。偽狂犬病毒具有泛嗜性,能在多種組織培養細胞內增殖,其中以兔腎和豬腎細胞(包括原I代細胞和傳代細胞系)最為敏感,并引起明顯的細胞病變,細胞腫脹變圓,開始呈散在的灶狀,隨后逐漸擴展,直至全部細胞圓縮脫落,同時有大量多核巨細胞形成。細胞病變出現快,當病毒接種量大時,在18~24h后即能看到典型的細胞病變。
實驗動物也可用于病毒的分離。在兔、1日齡小鼠和組織培養之間對偽狂犬病毒的敏感性無顯著差異,但成年鼠與新生鼠相比有較強的抵抗力。雖然雞胚對偽狂犬病毒不很敏感,但應用雞胚絨毛尿囊膜接種是最早用于病毒增殖和傳代的方法。
偽狂犬病毒基因組是線狀雙鏈DNA分子,大小約150kb,平均G+C含量高達74%,具有典型的皰疹病毒基因組結構特征,由獨特長區段、獨特短區段及位于US兩側的末端重復序列(TR)和內部重復序列(IR)組成。