由于豬炭疽多呈慢性或隱性，臨診癥狀不明顯，急性病例也少見，發生炭疽或疑似炭疽時禁止剖檢，炭疽病的正確診斷十分重要，所以必須進行實驗室檢查，血清學診斷。
1、臨診癥狀及流行情況調查
臨診癥狀的診斷價值不大，調查某些地區有否炭疽病發生、是否炭疽的疫源地等資料，可供診斷參考。
2、細菌抹片、鏡檢
簡便的方法是死豬耳靜脈或四肢末梢的淺表血管采取血液、水腫液，或脾臟及病變器官組織制成涂片，用姬姆薩或瑞氏染色液或堿性美藍染色，用顯微鏡檢查，可以看到單個或短鏈(2～4個菌體)相連有莢膜的兩端平截竹節狀大桿菌，即可確診。
豬體局部淋巴結涂片，炭疽的菌體形態常不典型，呈粗細不一菌鏈扭轉狀，菌體消失，可見莢膜“菌影”。 imuyi.com
3、細菌分離培養
采取新鮮病料接種于普通瓊脂平皿培養，若是污染或陳舊病料，可先做成懸液，70℃加熱30min，殺死非芽孢菌后再接種培養；若為腐敗病料，可先做成1:10乳劑接種小鼠，然后再取病料接種培養。根據菌落生長的特征做出判定。
如要與類屬的蠟樣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌區分，可進行7噬菌體裂解試驗、莢膜形成試驗及炭疽串珠試驗。
4、動物感染試驗
將病料用無菌生理鹽水稀釋5～10倍，對小鼠皮下注射0.1～0.2mL，或豚鼠0.2～0.5mL，或家兔1mL，經24～36h(小鼠)或2～4天(豚鼠、家兔)被接種動物死亡。死亡動物的臟器、血液等抹片，經瑞氏染色鏡檢，可見多量有莢膜的成短鏈的炭疽桿菌。死亡動物可見注射部位膠樣浸潤和脾臟腫大。也可用病料進行培養及炭疽沉淀反應檢查。
5、炭疽沉淀反應(Ascoli氏反應)
取病死豬的組織數克，剪碎或搗爛，加5～10倍生理鹽水，煮沸10～15min，冷后過濾或離心沉淀，用毛細吸管取上清液，沿管壁慢慢加入已裝有炭疽沉淀素血清(成品)的細玻璃管內，形成整齊的兩層液面，在兩液的接觸面出現清晰的白色沉淀環判為陽性(反應在1～2min內出現，最好在10～15min觀察)。
這個反應特異性高，操作簡便、迅速，檢出率高，即使腐敗的炭疽病料，仍可出現陽性反應?？h、鄉獸醫院(站)平時購入一定數量的沉淀血清，放冰箱保存備用，對及時確診本病有現實意義。
6、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、聚合酶鏈反應(PCR)等也可用于炭疽病的診斷。
