流行病學、臨診癥狀及病理變化等方面具有重要的診斷價值。但由于現在豬病種類繁多，且常常以非典型狀態出現，甚至呈隱性感染，確診豬瘟必須對病豬或特異性抗體進行實驗室檢測。一旦發現疑似豬瘟時，首先要采集病料，送往有關的實驗室做抗原的確診。
現將幾種主要的實驗室診斷方法介紹如下：
一、動物接種
檢測豬瘟病毒的敏感方法，應用易感的幼齡豬(10～20kg體重)進行接種試驗。取病料或新鮮豬尸的血液或組織乳劑，肌肉注射接種1～2頭幼豬。試驗豬應事先進行血清中和試驗，以排除有過豬瘟病毒或牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)的感染。
如果幼豬在接種后6～7天停食或體溫升高，則立即采血分離病毒。幼豬發病死亡后，立即采取扁桃體、脾臟、淋巴結、腎臟等做病毒分離。
如果幼豬在接種后21天不發病或發病后康復，則采血測定血清的中和抗體效價，并用強毒進行攻毒試驗。從血液或組織中可分離到豬瘟病毒，被接種的幼豬產生中和抗體，對強毒攻擊表現免疫性，即可判為陽性。
相反，幼豬不發病，不產生中和抗體，對強毒攻擊有易感性，則判為陰性。如果幼豬發病或死亡，但未分離出豬瘟病毒也不產生中和抗體，則應考慮其他病原感染的可能性。由于普遍存在低毒力的病毒株，所以被接種幼豬即使不呈現豬瘟癥狀，也應進行血液中的病毒分離試驗。 imuyi.com
二、免疫熒光試驗
主要用于檢測病毒抗原，是目前國內外實驗室診斷豬瘟的最常用方法，結果直觀、可靠。特別是在疫情初起必須查清病原、檢疫及以豬場豬瘟凈化時，此種檢測方法尤為重要。
進行免疫熒光試驗時，將待檢病豬的扁桃體、腎臟、淋巴結、脾臟等組織的冰凍切片或抹片，或待檢細胞培養片，經丙酮固定后，滴加豬瘟熒光抗體覆蓋于切片、抹片或細胞片表面，置37℃作用30min，然后用磷酸鹽緩沖液(PBS，pH7.2，0.01mol/L)洗滌，自然干燥后置熒光顯微鏡下觀察。必要時，設立抑制試驗染色片，以鑒定熒光的特異性。在熒光顯微鏡下，見切片、抹片或細胞培養物(細胞蓋片)中有胞漿熒光，并由抑制試驗證明為特異性熒光，判為豬瘟陽性反應；無熒光判為陰性反應。
必須指出，牛病毒性腹瀉病病毒與豬瘟存在共同抗原性，因此，牛病毒性腹瀉病病毒也能結合豬瘟熒光抗體。但因牛病毒性腹瀉病病毒對豬并無明顯的病原性，也不能在豬體內充分增殖，因此不至于干擾診斷結果，且因牛病毒性腹瀉病病毒可在細胞培養物上引起細胞病變，鑒定并不困難。
三、中和試驗
血清中和試驗可以檢出動物體內的抗體，但因推廣應用弱毒疫苗，豬群中的豬瘟抗體滴度普遍較高，故應進行雙份血清的檢查(前后期相差14天以上)，才能確立抗體滴度增高與感染患病的關系。
目前最常應用的血清中和試驗方法是免疫熒光中和試驗，即用定量病毒加不同稀釋度的被檢血清進行試驗。同時以SPF豬血清作為陰性對照，以豬瘟高免血清作為陽性對照。所有試驗血清均經56℃滅活30min后，按下列步驟進行：
用含0.5%乳白蛋白水解物和0.025mol/L的MgCl2•6H2O(即每1000mL中含有5.07g)的Earle氏液稀釋病毒和被檢血清。被檢血清按4倍連續稀釋法稀釋，由1:4至1:1024。
取不同稀釋度的血清分別和等量病毒液混合，置37℃感作1h，隨后接種飛片上的PK-15細胞培養物。同時設置各種對照組。再培養18～24h，取出后做免疫熒光抗體檢查。計數各飛片中熒光細胞灶的數目。與對照組相比較，凡能減少90%熒光細胞灶的血清稀釋度就是該血清的終點滴度。1:4血清組的熒光細胞灶減少不到90%者，判為陰性。
4、瓊脂擴散試驗
雖可選用病豬的脾、淋巴結和腸段為病料制備抗原，但以胰腺最好。另需要具備特異性好的豬瘟高免血清。本法操作簡單，但敏感性較低，肯定是豬瘟病例的陽性檢出率也低于50%。歐洲一些國家，如英國的某些診斷實驗室專門制備高價免疫血清和抗原，并有統一的判定標準。
用pH8.6的巴比妥緩沖液配制1、2%瓊脂，內加萬分之一硫柳汞防腐。按中央1孔，周圍6孔的模式打孔?？讖?mm，孔間距6mm。檢測抗原時，將高免血清滴入中央孔內，周圍孔內分別滴加標準抗原和待檢病料乳劑。檢測抗體時，將標準抗原滴入中央孔內，周圍孔上、下2孔內滴加高免血清，其他4孔分別滴加被檢血清。
5、新城疫病毒強化法
在一定條件下，先被豬瘟病毒感染的豬睪丸的細胞，在隨后再感染新城疫病毒時，可以產生細胞病變。這一現象被用來檢測豬瘟病毒，稱為新城疫病毒強化法，簡稱END(Exaltation of NDV)。
直接法END(將被檢病料直接接種細胞培養物)的敏感性較低，但如改用兩步法，即先將被檢材料接種豬脾細胞培養物，傳代適應之后再做END試驗，則可明顯提高其敏感性，幾乎能與易感豬接種法等同。
具體做法是在豬睪丸細胞培養物中接種被檢材料(HCV)，37℃培養4天，隨后接種106個蝕斑形成單位的新城疫病毒，繼續培養3天。根據是否出現細胞病變進行判定。同時設對照組。如果細胞培養物出現病變，即表示有豬瘟病毒存在。END法適用于檢測那些易在豬源細胞中生長的野外毒株，對大部分兔化弱毒株無效，因其往往不能在豬睪丸細胞內充分增殖。
6、酶標記抗體診斷法
先用PK-15細胞增殖HCV作為抗原，包被微量滴定板，隨后加入被檢血清(第一抗體)，沖洗后再加入酶標記的兔抗豬IgG，再經沖洗，最后加入底物顯色，判定結果。由于我國養豬業普遍實施豬瘟兔化弱毒疫苗預防注射，豬血清中幾乎都含有豬瘟抗體，給酶標抗體診斷法帶來一定的困難。所以，許多獸醫診斷室將該法只作為豬瘟免疫監測的一種手段。
7、單克隆抗體鑒別診斷
由于瘟病毒屬病毒之間存在共同的抗原性，血清學上產生交叉反應。在田間，豬不但可感染豬瘟，也可感染BVDV，而且豬感染后者之后產生病毒血癥，隨后產生抗豬瘟的中和交叉抗體，其臨診癥狀與尸檢結果和慢性豬瘟也難于區分。
免疫熒光試驗所用的抗豬瘟高免血清結合物也難于區分豬瘟和BVD病毒抗原。長期以來，我國普遍實行兔化弱毒疫苗預防注射，豬血清中幾乎都含有HC抗體，以常規血清學方法難于區分疫苗注射豬和野毒感染豬，給豬瘟的鑒別診斷帶來困難。有的國家為了在暴發HC時不至于誤診禁止使用疫苗。
隨著抗豬瘟單克隆抗體的研制成功，這一問題已經得到基本解決。在數小時之內便可區分豬瘟野毒株、疫苗株及BVDV，以及野毒感染產生的抗體和免疫抗體的區別。
